|
| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZ-75231 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 20T/50T |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號 | |
| 是否進(jìn)口 |
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售豬放線桿菌胸膜肺炎和副豬嗜血桿菌多重PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應(yīng)的分子生物學(xué)試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價格，歡迎新老客戶咨詢認(rèn)購。
產(chǎn)品詳細(xì)信息
名稱：豬放線桿菌胸膜肺炎和副豬嗜血桿菌多重PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨
規(guī)格： 20T/50T
品牌：上海滬崢
【用途】 用于豬放線桿菌胸膜肺炎和副豬嗜血桿菌病的檢測、診斷和流行病學(xué)調(diào)查。。
【操作步驟】
1. 病料處理
取適量病料關(guān)節(jié)液、心包積液、肺臟等組織，于滅菌研缽充分研磨，用PBS液按照1：3稀釋成均勻乳劑，-20℃反復(fù)凍融3次以上。
2 . DNA的抽提
(1) 取已凍融好的病料8000r/min離心5min，取上清500μl（或質(zhì)控樣品T，500μl），加50μl SR-I和6μl SR-II，50℃水浴1-2h，并不時顛倒混勻一下。
(2) 加入等量酚：氯仿（1：1），漩渦振蕩20s，4℃、12000r/min，離心5min。
(3) 取上清，加入等量氯仿，振蕩混勻，4℃、12000r/min，離心5min。
(5) 取400μl上清，加入800μl 無水乙醇，再加40μl SR-III，混勻。-20℃放置30~60min，4℃，12000r/min，離心10min，小心棄上清，沉淀即為DNA。用75%乙醇（滅菌雙蒸水配，每次加入500μl）沖洗2次，小心吸去75%乙醇，勿使DNA丟失，室溫晾干或超凈工作臺風(fēng)干15-25min，加入20μl TU-5溶解即為模板，即用或-20℃保存?zhèn)溆谩?/p>
3.PCR操作
4.電泳
稱量0.25g瓊脂糖，放入錐形瓶，加入25mL 1×TAE液（可配置50×濃縮液，儲存?zhèn)溆茫谖⒉t中熔解，加入1.5μl的TU-9混勻。封閉好電泳槽，加入梳子，倒入瓊脂凝膠，待凝固后，將PCR產(chǎn)物6μl混合1.5μl TU-7，加樣于凝膠孔中，同時在相鄰孔加入3μlTU-8，在100v 電壓下，1×TAE液中電泳30分鐘，在紫外成像儀下觀察結(jié)果。
【結(jié)果判定】
在342bp（豬放線桿菌胸膜肺炎）及841bp（副豬嗜血桿菌）位置出現(xiàn)擴(kuò)增帶，實驗結(jié)果為陽性
豬放線桿菌胸膜肺炎和副豬嗜血桿菌多重PCR診斷試劑盒
【注意事項】
1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時離心，使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復(fù)凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫擱置太久。
3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū)，避免交叉污染。
4. 加樣和反應(yīng)程序嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，由于操作失誤、移液器不精確、定時不準(zhǔn)確造成無結(jié)果情況，不予負(fù)責(zé)。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內(nèi)壁，可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。
|
|
|
|
|
|
