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| 產(chǎn)地 | 國產(chǎn) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號 | HZ-75242 |
| 用途 | 科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50T |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 否 |
上海滬崢專業(yè)生產(chǎn)銷售I型與新型鴨病毒性肝炎一步法RT-PCR鑒別診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應的分子生物學試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價格，歡迎新老客戶咨詢認購。
產(chǎn)品詳細信息
名稱：I型與新型鴨病毒性肝炎一步法RT-PCR鑒別診斷試劑盒
規(guī)格： 20T/50T
品牌：上海滬崢
【用途】 用于鴨病毒性肝炎的檢測、診斷和流行病學調查【操作步驟】1.RNA提取 (1) 取疑似鴨病毒性肝炎的病料（*、*、淋巴結等）1~4g于無菌研缽，研磨并用PBS液（pH7.2~7.4）稀釋成1：4乳劑，分裝1.5ml滅菌EP管，反復凍融2~3次，8000r/mi離心5分鐘。（病毒培養(yǎng)液，只需凍融1次即可8000r/min心5分鐘）2）取200uL上清液（或標準品Ｔ），移入新的1.5mL滅EP管中，加入200uLSR-I，漩渦振蕩混合均勻，靜置5min。
（3）加75uL TU-1，漩渦振蕩混合均勻，10000r/min離心5 min。
（4）將上清轉移到新的2 ml離心管（試劑盒內提供）中，加入300 uL 異丙醇（1%冰乙酸），上下倒置6-8次，混合均勻。
（5）將步驟4中的混合液移入制備管中，并將制備管置于同一2 ml離心管，10000 r/min離心1min。
（6）棄濾液，將制備管置回到2 ml離心管中，加500 uL SR-II，室溫靜置1min，10000 r/min離心1 min。
（7）棄濾液，將制備管置回到2 ml離心管中，加700 uL SR-Ⅲ，10000 r/min離心1 min。
（8）將制備管置回到2 ml離心管中，10000 r/min離心1 min。
（9） 將制備管置于潔凈的1.5 ml離心管中（試劑盒內提供），在制備管膜中央加40 uL TU-2， 室溫靜置1 min。10000 r/min離心1 min洗脫。洗脫液即為模板，即用或-70℃凍存?zhèn)溆谩?/p>
3 .PCR操作
4.電泳
配制1%瓊脂糖凝膠，取PCR產(chǎn)物5uL混合1uL TU-8，加樣于凝膠孔中，同時在相鄰孔加3uLTU-7，在120v 電壓下，1×TAE液中電泳15分鐘，在紫外成像儀下觀察結果。
【結果判定】
在約230bp位置出現(xiàn)擴增帶，實驗結果為I型鴨肝炎病毒檢測為陽性；在約705bp位置出現(xiàn)擴增帶，實驗結果為新型型鴨肝炎病毒檢測陽性
I型與新型鴨病毒性肝炎一步法RT-PCR鑒別診斷試劑盒
【注意事項】
1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時離心，使試劑沉于管底。
2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫擱置太久。
3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū)，避免交叉污染。
4. 加樣和反應程序嚴格按照說明書進行，由于操作失誤、移液器不精確、定時不準確造成無結果情況，不予負責。
5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內壁，可用鑷子夾取。
6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。
血清學診斷技術
血清學診斷技術是建立在抗原與相應抗體在體外發(fā)生特異性結合反應基礎上的檢測技術，隨著科學技術的不斷發(fā)展和提高，血清學抗體檢測新技術層出不窮，應用面也日益擴大。如病毒中和試驗、血凝和血凝抑制試驗、瓊脂凝膠擴散試驗、血清平板和試管凝集試驗、免疫膠體金層析技術、酶聯(lián)免疫吸附試驗等，這些試驗方法已被大多數(shù)實驗室熟練掌握應用。如布病采用平板或試管凝集試驗，禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制試驗，豬瘟和口蹄疫采用間接血凝試驗；采用 ELISA 試驗檢測禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫病，養(yǎng)殖場也可采用血凝試驗和免疫金標技術來檢測免疫抗體滴度，操作簡便快速，使抗體監(jiān)測技術真正得以推廣 , 切實為動物疫病防控提供有力的幫助。
