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| 產(chǎn)地 | 國(guó)內(nèi) |
| 品牌 | 上海滬崢 |
| 貨號(hào) | HZW0444 |
| 用途 | 僅限科研 |
| 包裝規(guī)格 | 48T/盒 |
| 純度 | 詳詢客服% |
| CAS編號(hào) | |
| 是否進(jìn)口 |
產(chǎn)品名稱：轉(zhuǎn)基因植物RNA-Leu基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?
包裝：48T
分類：pcr-熒光試劑盒
用途:本產(chǎn)品僅供科研與實(shí)驗(yàn)使用，不用于臨床診斷等
目的：本試劑盒適用于檢測(cè)疑似感染者或發(fā)病動(dòng)物等組織、體液或淋巴結(jié)等標(biāo)本中禽流感病毒rna，用于禽流感病毒感染的輔助診斷，其檢測(cè)結(jié)果僅供參考。
轉(zhuǎn)基因植物RNA-Leu基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? PCR擴(kuò)增時(shí)在加入一對(duì)引物的同時(shí)加入一個(gè)特異性的熒光探針，該探針為一寡核苷酸，兩端分別標(biāo)記一個(gè)報(bào)告熒光基團(tuán)和一個(gè)淬滅熒光基團(tuán)。探針完整時(shí)，報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收；剛開(kāi)始時(shí), 探針結(jié)合在DNA任意一條單鏈上;PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶的5’端－3’端外切酶活性將探針酶切降解，使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離，從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào)，即每擴(kuò)增一條DNA鏈，就有一個(gè)熒光分子形成，實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物形成完全同步。
轉(zhuǎn)基因植物RNA-Leu基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 設(shè)置 RT-PCR 反應(yīng)（30 uL 體系）
在PCR 管中加入下列成分：
成份 |
樣品 |
陽(yáng)性對(duì)照 |
陰性對(duì)照 |
雙酶一管式 RT-PCR Buffer， 2× | 15 uL | 15 uL | 15 uL |
EMCV 專一性引物對(duì) | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
樣品 RNA | 1-5 uL | 無(wú) | 2 uL |
EMCV 陽(yáng)性對(duì)照 | 無(wú) | 2 uL | 無(wú) |
補(bǔ)超純水到 | 28 uL | 28 uL | 無(wú) |
MMLV-Taq Mix | 2 uL | 2 uL | 2 uL |
[1] 輕柔混勻后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 RT-PCR。
轉(zhuǎn)基因植物RNA-Leu基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 電泳檢測(cè)RT-PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 286 bp。
轉(zhuǎn)基因植物RNA-Leu基因核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)? 【參考值（參考范圍）】
結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則：閾值線設(shè)定于剛好超過(guò)陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音
情況進(jìn)行調(diào)整。
2 結(jié)果描述及判定
陽(yáng)性對(duì)照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú) Ct 值并且無(wú)特定擴(kuò)增曲線，實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立；被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線為 AIV 陽(yáng)性；被檢樣品 30＜Ct＜37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線，需重新取樣提取 RNA，擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定，如仍是可疑，可判定為陽(yáng)性；被檢樣品 Ct 值≥37 時(shí)，超過(guò)本方法檢測(cè)靈敏度范圍，判定為陰性；對(duì)于某些未呈現(xiàn) S 型曲線，但本底較高的樣 品，應(yīng)為陰性。
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